应用SYBR Green I的Real-time PCR方法定量检测空肠弯曲杆菌

空肠弯曲杆菌(Campylobacterjejuni)被认为是人类主要食源性病原菌之一。由于空肠弯曲杆菌特殊的生长条件和容易进入不可培养但存活的状态(Viablebutnonculturable,VNC),所以传统的生化鉴定结果不一定可靠,并且是一项费时而繁琐的工作。核酸检测方法的出现为空肠弯曲杆菌的检测带来了方便。本文基于LightCycler为平台,利用SYBRGreenI染料能特异与双链DNA结合而发荧光的特性,建立一种Real-timePCR方法来定量检测空肠弯曲杆菌。用该方法检测时,发现所有空肠弯曲杆菌(11株)都呈阳性,所有其它弯曲菌(3株)和其它菌株(5株)都是阴性。整个检测过程60min内可以完成,检测限度为5CFU,标准曲线的相关系数为1。结果表明基于SYBRGreenI的定量PCR方法既为空肠弯曲杆菌提供了一种特异、敏感、快速和简洁的定量检测方法,又为研究空肠弯曲杆菌致病机理提供了一种重要方法。     

草地早熟禾与狗牙根种群动态及种间关系的影响

 以狗牙根和草地早熟禾为材料,用二因素二次正交旋转设计,对9个不同播种比例混播草坪的种群性状进行研究,建立了草坪地上生物量、地下生物量及一致性与狗牙根和草地早熟禾播种量之间显著相关的回归模型。确定了影响草坪性状的主要因子,优化了混播草坪的最佳播种量。     

NM－1号抗旱剂的研究

试验结果表明谷子在—１３．９Ｐａ的负压下发芽率只有２４．０％，在—１６．７３Ｐａ时发芽率为１６．３％。用０．５％的ＮＭ—１号抗旱剂包衣后，在—１６．７３Ｐａ的负压下发芽率可达６５．６％，比对照提高４９．３％。同０．５％的ＮＭ—１抗旱剂在大豆现蕾期喷施叶面１次，相对收获株率为１１５．３８％，相对千粒量为１０７．７％，增产率为４０，２７％。玉米在６叶期喷施０．５％的抗旱剂后，饱和亏减少４．０９ｇ，是对照的４３．８１％；干物质积累比对照快６７．１９％，蒸腾系数减少８．３６ｇ。     

新城疫（ND）—减蛋综合征（EDS76）蜂胶二联灭活疫苗的研制Ⅰ．制苗工艺、疫苗安全性和免疫原性试验

将新城疫病毒（NDV）Colon-30株和减蛋综合征病毒（EDS76AV）－127株分别接种于非免疫鸡胚和鸭胚，制备抗原液。抗原液经甲醛灭活后，与纯化的天然免疫增强剂蜂胶乳化，制成鸡新城疫（ND）－减蛋综合征（EDS76）蜂胶二联灭活疫苗，对疫苗的安全性和免疫原性进行了测定。对3－6周龄易感雏鸡以2倍使用剂量肌内注射，安全性良好；对1日龄雏鸡接种1个使用剂量进行急性毒性试验。15d生长曲线表明，对雏难 影响。对6周龄雏鸡注射1个使用剂量，每批疫苗免疫10只鸡，免疫后5－32d，鸡血清中EDS76血凝抑制（HI）抗体的几何平均滴度（GMT）为6．5－11．8log2,ND血凝抑制（HI）抗体的几何平均滴度（GMT）为4．8－9．8log2；对ND免疫攻毒试验表明，3批疫苗，每羽份含有的半数保护量（PD50）分别为≥127、≥131和≥127。     

猪肺炎支原体黏附因子基因R1R2区的克隆及表达

根据GenBank登录的猪肺炎支原体232株P97基因和J株黏附因子基因设计了1对引物，以我国猪肺炎支原体Z株(强毒株)基因组DNA为模板，通过PCR方法扩增了该株黏附因子基因的部分序列。经序列分析后，重新设计了1对带有EcoRI和HindⅢ酶切位点的引物，并经引物的定点突变，PCR扩增了Z株黏附因子的R1R2区。扩增产物经双酶切后克隆到表达载体pET-32(a) 中。该重组质粒经酶切鉴定后，将其具有正确阅读框架的重组质粒转化到大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞，37℃下经IPTG诱导表达，得到相对分子质量约29000的融合蛋白，表达量约为11％。     

不同喂养条件和营养强化对大型Sou总脂及脂肪酸组成的影响

大型Sou的总脂和脂肪酸组成随食物的变化及营养强化的实施而发生显著变化。酵母组总脂为2．5％，明显高于海水小球藻组（1．65％）和有机肥组（1．5％）。经鱼油强化或海水小球藻二次培养后脂类含量明显升高。三组中酵母组的MUFA含量是高为55％。主要是C16：1ω9（23％），而PUFA最低（16．6％），其中EPA（2．7％）、DHA（0．8％）等ω3HUFA含量均很低；与酵母组相比，海水小球藻组和有机肥组的MUFA含量显著下降，PUFA含量显著升高，均为30％－33％左右，三组中海水小球藻组EPA含量最高（14％），其次是有机肥组（5．9％）和酵母组（2．7％）；有机肥组DHA含量最高，达11．7％，而酵母组和海水小球藻组DHA含量均低，仅为0．7％－0．8％。经鱼油强化后，酵母组的MUFA含量显著下降，PUFA显著升高，EPA由2．7％提高到10％左右，DHA由0．8％以7％；酵母组经海水小球藻二次培养后MUFA显著降低，PUFA相应升高，EPA由2．7％提高到9．7％，而DHA含量无变化。     

特种脱水蔬菜研究进展

综述了国内外特种脱水蔬菜的生产状况和趋势，特种脱水蔬菜的加工技术，特种脱水蔬菜生产成果及展望。     

淡紫拟青霉菌料防治大豆胞囊线虫的后效研究

淡紫拟青霉不同菌株的培养菌料，施２２５ｋｇ／ｈｍ２，对大豆胞囊线虫不但当年有４５％～６９％的较好防效，而且第２年和第３年仍然有２２．５％～３７．７％和７．３％～２２．９％的后效，即空胞囊和被寄生的胞囊数量增加。     

制度给力成效显著——山东省精心打造农机购置补贴惠民工程

近几年来,山东省各级农机部门精心打造农机购置补贴惠民工程,坚持突出重点、规范操作、优化服务、强化监管,确保了补贴工作顺利高效运行,取得了农民得实惠、企业得效益、农机得发展、政府得民心的好效果.     

玉米新品种先农998的选育及高产栽培技术

云南地势北高南低,海拔高度相差大,土壤类型多种多样,气候呈垂直分布,加上山区旱地土壤多,农业耕作技术比较传统,因此对玉米品种的综合抗性要求较高。先农998是华中农业大学于2009年在海南省陵水县用自交系A156作母本、自交系A255作父本杂交组配而成的玉米单交种,云南试验示范的5年来,均表现出高产、高抗灰斑病的特点,适合云南省大部分区域种植。